Leica SP8 FALCON的使用技巧可以歸納為以下幾個(gè)方面：

1. 熒光壽命測(cè)量步驟：

• 預(yù)覽及調(diào)節(jié)參數(shù)：點(diǎn)擊預(yù)覽，系統(tǒng)會(huì)顯示熒光強(qiáng)度圖、平均熒光壽命圖和平均熒光壽命曲線。根據(jù)光子數(shù)直方圖中的紅線提示，調(diào)節(jié)激光強(qiáng)度以獲得理想的光子數(shù)。

• 設(shè)置條件并采圖：在采集時(shí)間、采集幀數(shù)及最大光子數(shù)中選擇設(shè)置一項(xiàng)。如果需要采集時(shí)間序列或三維圖像，按常規(guī)共聚焦采集模式設(shè)置總時(shí)長(zhǎng)或?qū)忧衅瘘c(diǎn)/終點(diǎn)。然后點(diǎn)擊start進(jìn)行采圖。

• 數(shù)據(jù)分析：選擇壽命成分?jǐn)?shù)量，點(diǎn)擊Fit，系統(tǒng)即自動(dòng)進(jìn)行曲線擬合。壽命成分?jǐn)?shù)量可從1開(kāi)始，直至獲得滿意的擬合曲線。系統(tǒng)根據(jù)擬合結(jié)果顯示熒光壽命圖。

2. 壽命成分拆分圖像：
   根據(jù)擬合出的壽命成分，可以對(duì)圖像進(jìn)行拆分，得到不同壽命的圖像。這特別適合于拆分光譜接近的不同染料或者染料和自發(fā)熒光。

3. 三維熒光壽命圖像的采集和顯示：
   對(duì)于厚樣品，F(xiàn)ALCON可以直接采集和顯示三維的熒光壽命圖像，甚至可以通過(guò)LAS X的3D重建模塊制作成視頻。

4. 開(kāi)機(jī)順序與操作界面：

• 開(kāi)機(jī)時(shí)，注意FSU和CSU硬件的電源控制，先啟動(dòng)電腦，再打開(kāi)顯微鏡控制的開(kāi)關(guān)，然后依次打開(kāi)其他設(shè)備。

• 進(jìn)入操作界面后，可以選擇不同的功能界面進(jìn)行參數(shù)設(shè)定、掃描取圖、圖像處理和定量測(cè)量等操作。

5. 熒光壽命測(cè)量的原理：

• 使用光脈沖照射樣本，測(cè)量發(fā)射光子到達(dá)的時(shí)間。這種測(cè)量需要在同一樣本位置重復(fù)幾次，測(cè)量幾百個(gè)事件以達(dá)到大約10%的準(zhǔn)確度。然后將數(shù)據(jù)按時(shí)間分組放入直方圖中進(jìn)行重建。

請(qǐng)注意，以上技巧是基于Leica SP8 FALCON的一般操作方法和原理，具體操作可能因設(shè)備配置和使用環(huán)境的不同而有所差異。在使用時(shí)，建議參考設(shè)備的官方操作手冊(cè)或聯(lián)系專業(yè)技術(shù)人員進(jìn)行指導(dǎo)。